常用的灭菌方法
常用的灭菌方法
1、热力灭菌:利用高温使菌体蛋白质变性或凝固,代谢发生障碍, 导致细菌死亡。包括:
(1)焚烧法:用火焚烧,是很彻底的灭菌方法,适用于废弃的污染物品和有传染性的动物尸体等。
(2)烧灼法:直接再火焰上烧灼,用于接种环(针)和试管口或瓶口的灭菌。
(3)干烤法:在干烤箱通电后利用高热空气进行灭菌。一般加热160-170℃, 维持2小时即可杀灭包括芽胞在内的一切微生物。主要用于玻璃器皿、 磁器或需干燥的注射器等。
(4)煮沸法:煮沸100℃5分钟可杀死细菌的繁殖体,一般消毒以煮沸10分钟为宜。如需要杀死芽胞则要煮沸1-3小时。主要用于一般外科器械、注射器、胶管和食具等的消毒。
(5)间歇灭菌法:是利用反复多次的流通蒸汽, 杀死细菌所有繁殖体和芽胞的一种灭菌法。本法适用于耐热物品,也适用于不耐热(<100℃)的一些物质如某些培养基的灭菌。具体做法是将待灭菌的物品置于阿诺氏流通蒸汽灭菌器内,100℃加热15-30分钟杀死其中的细菌繁殖体,然后将物品置37℃温箱中过夜,使芽胞发育成繁殖体,次日再通过流通蒸汽加热,如此连续三次,可将所有繁殖体和芽胞全部杀死。若有某些物品不耐100℃,则可将温度降至75-80℃, 每次加热的时间延长至30-60分钟, 次数增至3次以上,也可达到灭菌目的,如用血清凝固器对血清培养基或卵黄培养基的灭菌。
(6)巴氏消毒法:由巴斯德创建,常用于牛奶和酒类的消毒。一般加热61.1-62.8℃半小时, 或71.7℃经15-30秒钟, 便可达到杀死病原菌或一般杂菌, 而不严重破坏物品的质量的目的。
(7)压力蒸汽灭菌器与蒸汽压力灭菌器法:是灭菌效果最好、目前应用最广的灭菌方法。利用蒸汽压力灭菌器或者压力蒸汽灭菌器进行灭菌,由于密闭容器加温所产生的高压饱和水蒸汽能获得较高的温度,通常在1.05kg/cm2的压力下, 温度达121.3℃, 维持15-30分钟, 可杀死包括细菌芽胞在内的所有微生物。此法适用于高温和不怕潮湿物品的灭菌,如普通培养基、生理盐水、手术器械、注射器、手术衣、敷料和橡皮手套等。
在同样温度下, 蒸汽压力灭菌器和压力蒸汽灭菌器的灭菌效果比干热灭菌好, 原因是:
A、湿热中菌体吸收水份, 蛋白质较易凝固。
B、湿热比干热的穿透力好, 这主要是由于水或饱和水蒸汽传导热能的效率明显高于空气。蒸汽容易穿透到物体的深部, 使灭菌的物体内部温度迅速上升。
C、蒸汽有潜热存在。每一克水在100℃时, 由气态变为液态可放出529卡的热量。当蒸汽与被灭菌的物体接触时凝结成水, 放出潜热, 能迅速提高灭菌物体的温度。
2、紫外线灭菌:紫外线杀菌原理是通过干扰细菌DNA的合成, 波长2650-2660A杀菌力最强。紫外线作用的特点是(1)穿透力弱,只能用于房间空气、物体表面消毒;(2)杀菌效果与照射时间, 距离和强度有关;(3)对眼睛角膜和皮肤有损伤作用,工作人员切勿在紫外线灯照射下进行操作。
日光中含有大量紫外线。将病人的被褥、衣服、书报等放在强烈的日光下爆晒数小时, 可达到消毒的目的。