培养用品的清洗和消毒灭菌

一． 清洗

1.    玻璃器皿

一般用毛刷和洗涤剂进行清洗，以去除器皿的杂质。要注意两点：一是洗刷时不宜用力过猛，二是不能留有死角，特别要注意瓶角度等部位的洗涤。洗刷后用蒸馏水冲洗三次，去离子水冲洗一次。晾干

2.    胶塞 盖子等杂物

细胞培养中所用的橡胶制品主要是瓶塞。新购置的瓶塞带有大量滑石粉及杂质，应先用自来水冲洗，再做常规处理，常规清洗方法是：每次用后立即置入水中浸泡，然后用2% NaOH或洗衣粉煮沸10-20分钟，以除掉培养中的蛋白质。自来水冲洗后，再用1%稀盐酸浸泡30分钟或蒸馏水冲洗后再煮沸10-20分钟，晾干备用。

3、塑料制品的清洗

塑料自制品现多是采用无毒并已经特殊处理的包装，打开包装即可用，多为一次性物品。必要时用2% NaOH浸泡过夜，用自来水充分冲洗，再用5%盐酸溶液浸泡30分钟，最后用自来水和蒸馏水冲洗干净，晾干备用。

 

二．将清洗干净的物品放入烤箱中烤干

三．泡酸   泡碱

1.玻璃器皿

玻璃器皿一般用由浓硫酸，重铬酸钾及蒸馏水配制而成的清洁液浸泡。清洁液配制时应注意安全，须穿戴耐酸手套和围裙，并要保护好面部及身体裸露部分。配制过程中可使重铬酸钾溶于水中，然后慢慢加浓硫酸。并不停的用玻璃棒搅拌，使产生的热量挥发，配制过程中可使重铬酸钾溶于水中，然后慢慢加浓硫酸。并不停的用玻璃棒搅拌，使产生的热量挥发，配制溶液应选择塑料制品。配成后清洁液一般为棕红色。泡酸时应将器皿轻轻放入，避免灼伤；还应是器皿内全部充满清洁液不留气泡；一般浸泡过夜。

2.胶塞 盖子等

清洗后将用品放入1mo/LNaOH中浸泡6-7h.

四． 灭菌.

取出上述处理过的物品，清洗，然后进行灭菌

高压蒸汽灭菌器：

一般物品（布类 金属器皿 玻璃器皿）消毒要求为15磅20分钟，一些常规使用液体消毒要10磅15分钟，橡胶用品为10磅10分钟。

高雅灭菌注意以下几点：

物品不宜放得太满，物品之间要留有空隙以免影响高压蒸汽流通。

消毒过程中，操作者不能离开工作岗位，要定时检查压力及安全，防止消毒及表皮意外事件发生。

消毒完毕不要急于取出物品，用余热去除其中部分湿气。

取出后放入烤箱烤干水分。     

五．放入烤箱烤干，放好备用。