培养基配制规程

2011-03-13

目的:
     建立培养基配制的基本操作,为培养基配制人员提供正确的操作规程。
  2.  依据:    
    《中华人民共和国药典》2000年版二部。
    3.  范围:
     本标准适用于无菌检查用培养基和微生物限度检查用培养基的配制。
    4.  职责:
     QC微生物检验员、无菌检验员对本标准的实施负责。
    5.  程序:
    5.1.  本规程中配制所用培养基均为脱水干燥商品培养基。
5.2. 无菌检查用培养基的配制:
    5.2.1.  配制用具:
  电热手提式压力蒸汽灭菌器、燃气灶、搪瓷缸、玻璃棒、输液瓶、输液瓶塞、试管、试管架、棉塞、细绳、硫酸纸、天平、砝码、药匙、量筒。
    5.2.2.  根据配制量称取干燥培养基基质,置搪瓷缸中。
    5.2.3.  根据培养基瓶上标签说明,加入适量纯化水,使溶解。
5.2.4. 将搪瓷缸放到燃气灶上煮沸。

  根据培养基瓶上标签说明,调节pH值,使灭菌后pH值达到规定的要求。
    5.2.6.  分装到若干支试管中(直接接种法培养基15ml/管,试管口塞好棉塞。薄膜过滤法培养基装入输液瓶中。    
    5.2.7.  若干支试管集中在一起,顶部用硫酸纸盖好,用细绳捆扎后,放入灭菌器中按规定条件灭菌。输液瓶口用纱布盖好,用细绳捆扎后,插好放气针头,放入灭菌器中按规定条件灭菌。
    5.2.8.  配制的培养基应进行培养后再使用。需气菌、厌气菌培养基经30—35℃培养48小时,真菌培养基经20—25℃培养72小时后应无菌生长。
    5.3.  微生物检查用培养基的配制
5.3.1. 配制用具:
    电热手提式压力蒸汽灭菌器、燃气灶、搪瓷缸、玻璃棒、三角瓶、棉塞、细绳子、硫酸纸、天平、砝码、药匙、量筒。
5.3.2. 根据配制量称取干燥培养基基质,置搪瓷缸中。
5.3.3. 根据培养基瓶上标签说明,加入适量纯化水,使溶解。
5.3.4. 将搪瓷缸放到燃气灶上煮沸。
5.3.5. 根据培养基瓶上标签说明,调节pH值,使灭菌后pH值达到规定的要求。
5.3.6. 分装到若干个三角瓶中,瓶口塞好棉塞,盖上硫酸纸捆扎好,放入灭菌器中,
按规定条件灭菌。
5.3.7. 灭菌后的培养基,待冷却后,放入冰箱中保存,临用时,取出加热使溶解,
再倾注入平皿中。